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weinaBB

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于启动子区甲基化

请教大家:最近在做一个基因启动子区的甲基化(亚硫酸氢盐修饰后测序法)。启动子区GC%=61.2,一直扩不出来。请各位提点意见!若是一直扩不出来,除了这个方法,还有没有其他的简单易行的方法。
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ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
能不能买到BAC,PAC什么的?然后从BAC,PAC上切下来
2楼2009-06-04 12:41:45
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我做过,推荐使用Invitrogen的Platinum Taq,绝对能出来
3楼2009-06-04 13:31:27
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weinaBB

新虫 (初入文坛)

谢谢回贴。那设计引物的时候,引物中是不是应该尽量避免过多的C碱基?引物设计有没有什么要注意的呢?
4楼2009-06-04 14:48:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引物设计使用MehtPrimer
5楼2009-06-04 15:45:14
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bbyu007

木虫 (正式写手)

GC 含量高的话,在PCR体系中少加点DMSO,试试看吧,没有P不出来的东西!
GL~~~~~~~~~~
我是笨笨鱼~~~
6楼2009-06-04 16:30:17
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ssunshine

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
试验高GC buffer,然后用hot start taq就好
7楼2009-08-12 23:01:30
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