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YangLryyc

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[交流] 高盐和低盐buffer的作用

请问各位前辈：
破细胞抽提蛋白时候经常用到high salt buffer和low salt buffer，但不知道它们的作用分别是什么？
恳请指教：）

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 12:51 ]

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1楼 2009-06-03 22:35:20

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shengsheng

新虫 (初入文坛)

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是破细胞除蛋白提DNA吗
过层析柱low salt buffer洗脱蛋白和RNA，DNA挂在柱上，high salt buffer洗脱DNA，收集纯化DNA

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2楼2009-06-03 22:44:38

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spark_online

木虫 (初入文坛)

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low salt wash buffer 和 high salt wash buffer就是纯化时用的两种洗脱溶液，就好像HPLC中用两种buffer（如水和CH3CN)做为固定相和移动相，有机中用两种溶剂（如乙酸乙酯和石油醚）过柱子，其中分离纯化的思路基本差不多。但对于蛋白质来说，任何强烈的有机溶剂和酸碱条件都不能用，所以采用不同浓度的盐溶液。高浓度的盐溶液可以改变电荷分布和电荷间的相互作用，从而起到洗脱的作用。

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3楼2009-06-04 08:06:45

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YangLryyc

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谢谢指教

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4楼2009-06-05 13:05:11

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