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如何利用已知的知识，发现不一样的世界
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最近中科院生物物理所刘志华团队在《Cell Research》上发表文章，发现肠菌促进胰岛素分泌的机制。该工作入选2019年Cell Research第七期封面论文。研究者综合已知的发现，提出自己的假说，并严密论证自己的观点（了不起，伟大！仰望！），今天我们学习一下的研究思路： Cell Research：肠菌促进胰岛素的分泌 ——Intestinal Lysozyme Liberates Nod1 Ligands From Microbes to Direct Insulin Trafficking in Pancreatic Beta Cells 期刊名： cell resreach，IF17.2 发表时间：2019-7 技术平台：IF+IP 材 料： GF小鼠、SPF级小鼠、myd88 -/-小鼠 、Rip2-/-小鼠、Nod1-/-小鼠、Lyz1−/− GF小鼠、Lyz1−/− 小鼠 NS-1 832/13 cells、HEK293T cells 研究背景：2型糖尿病与肠菌结构异常相关，进一步发现肠菌影响胰岛素分泌囊泡在胰岛beta细胞中的分布，NOD1受体在胰岛素耐受性，胰岛beta细胞影响胰岛素分泌，本文主要是探究肠道菌促使胰岛素囊泡的成熟与分泌的机制的。 已知条件： 基因Rip2和Nod1影响胰岛分泌 通过组学分析，发现L. plantarum菌及其代谢产物iE-DAP，影响胰岛分布 溶菌酶影响胰岛分布 求证：肠菌促进胰岛素分泌的机制 思路： 证明肠道菌群的必要性（GF VS WT） 证明因Rip2和Nod1的必要性及相关性 （找到Rip2和Nod1的相互作用机制） 证明肠菌代谢产物的充分必要性 证明溶菌酶的必要性 整理“溶菌酶-肠菌代谢产物-Rip2和Nod1”的逻辑关系，并提出假说 方案设计： 比较无菌小鼠与SPF小鼠胰岛细胞。观察胰岛分泌情况 用WT小说和基因敲除小鼠（myd88 -/-和Rip2-/-）。观察胰岛分泌情况 通过Rip2f/f, Ins2Cre, and Rip2beta-cko mice。观察胰岛分泌情况 根据Rip2的功能，找到Nod1基因；构建Nod1-/-小鼠及Nod1beta-cko小鼠。观察胰岛分泌情况 给GF小鼠添加细菌的代谢产物和其他物质；给GF移植某些细菌。观察胰岛分泌情况 用细胞系INS-1 832/13 cells加药物。观察胰岛分泌情况 用细胞系HEK293T cells和INS-1 832/13 cells。观察Nod1 and Rip2的相互作用 用Lyz1−/− GF小鼠，GF小鼠加药物，观测Nod1的活性和胰岛分泌情况 研究结果： 肠菌影响胰岛分布（胰岛b细胞）。 找到影响胰岛分泌的基因Rip2和Nod1。 证明了某肠菌是胰岛分泌的必要条件 证明Nod1 and Rip2的共同作用，是胰岛分泌的必要条件 证明溶菌酶，是胰岛分泌的必要条件 结论：胰岛beta细胞通过表达胞内细菌肽聚糖受体Nod1来感知肠道菌的配体信号，以协助胰岛素囊泡的顺势转运，促进胰岛素的分泌 总结：思路清晰，结论论证严密！ |
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