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求助马来酰亚胺基团与巯基加成反应已有2人参与
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最近在做马来酰亚胺与巯基的加成反应，是将两种物质溶于缓冲液，氮气保护反应48h，但是最后做质谱一直做不出来，请大家帮忙指点一下迷津。另外想问一下，有必要在反应体系中添加TCEP作为还原剂吗？还有TCEP会和马来酰亚胺基团反应吗？ 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2019-12-16 10:14:23
【答案】应助回帖
| 巯基-马来酰亚胺的反应一般来讲条件很简单：加PBS溶液做缓冲液或者乙酸铵溶液做缓冲溶液都是可以很容易进行的。质谱做不出是指没有产物还是也没有反应物？如果没有反应物和产物，可能你的反应物再你所说的缓冲溶液中不稳定分解了。如果有反应物，无产物考虑反应没发生，可能的结果是：1. 检测是否硫醇被氧化生成了二硫键。2. 检测马来酰亚胺是否被水解，水解后的马来酰亚胺依旧保留双键但是因为环形的共轭结构被改变，普通的反应条件无法使其与巯基反应，需再加引发剂促进反应发生。以上两种情况虽然反应物变性，但是他们质量的改变用质谱很难测出来。对于第一种可能，加还原剂先还原二硫键，再反应。第二种可能，将未水解的马来酰亚胺放置在干燥的环境中保存。常规手段是加入TCEP确保二硫键被还原从而不影响反应的进行，且TCEP不会与maleimide反应。 |
3楼2020-01-15 02:31:39
4楼2020-09-04 21:01:44