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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提质粒浓度很低，260/280的值都大于2
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15761622115

铁虫 (小有名气)

[求助] 提质粒浓度很低，260/280的值都大于2 已有6人参与

我最近提质粒浓度都很低，低至十几ng/uL，OD260/280却很高，都大于2，还有大于3的，这是怎么回事，我严格按照说明书操作的。
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1楼 2019-09-15 10:35:56
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

MAZ4HK

新虫 (初入文坛)
建议跑胶看看，估计没有质粒。
如果质粒太大可以考虑室温25C 摇菌。
也有可能有污染，比如酵母。
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14楼2019-12-26 08:37:45
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qaz199018

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-09-22 22:07:52
摇菌时间不要过长，否则死细菌太多的话也不利于抽提质量
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~~~
4楼2019-09-15 15:47:35
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岛城丰雨

新虫 (初入文坛)
是不是低拷贝的质粒

发自小木虫Android客户端
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5楼2019-09-16 09:19:34
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lxin_yu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-09-22 22:08:04
你是提什么菌株的质粒呢？如果不是克隆菌株的话，可以试一下大提，一次性提取大量质粒试试
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6楼2019-09-19 16:28:36
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周霸霸霸

新虫 (小有名气)
同意先跑胶看看有没有你要的质粒

发自小木虫IOS客户端
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8楼2019-09-29 12:18:58
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emosgaogao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉应该是质粒的拷贝数不够，下次做的时候，做一个以前就能提出来的质粒菌种做阳性对照来证明提取方法是靠谱的。
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忍得住诱惑，耐得住寂寞
9楼2019-10-09 21:36:31
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

是你自己构建的质粒再提取吗？我感觉不是方法的问题，而是你的宿主菌里可能就没有你的目的质粒。PCR确认后再摇菌重提吧。
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10楼2019-10-14 10:58:34
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普通回帖

木元雨

木虫 (职业作家)
跑胶检测一下

发自小木虫Android客户端
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2楼2019-09-15 11:01:05
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摩卡~~

禁虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-09-22 22:07:44
本帖内容被屏蔽
3楼2019-09-15 12:01:04
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fjjyh1234

新虫 (初入文坛)
试剂盒问题

发自小木虫Android客户端
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7楼2019-09-21 14:44:45
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