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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 关于走Sephadex LH-20问题
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liu33feng

[交流] 关于走Sephadex LH-20问题

大虾们，好
我跑柱后，所要组分点板，层析液为：氯仿：甲醇7：1.   有1个点很明显，但隐约有两三个不明显的点挨得很近（好像有点拖尾），我不太懂混合溶剂极性，大虾们介绍个同样极性的混合溶剂，我试下。
这个情况 好像过硅胶柱难分，挨得太近了。

现在想用Sephadex LH-20进一步纯化，用分析甲醇洗可以吧。
希望大家指拨12。
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1楼 2009-06-03 09:05:57
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yuanchao79

金虫 (著名写手)
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clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 6-3 16:23
甲醇，乙醇都可以洗柱子。
混合溶剂你试试氯仿/丙酮 1/1； 或者乙醚/丙酮 1/1；或乙酸乙酯/丙酮，微调一下

最好先看看各种溶剂极性顺序！
祝你好运
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多一点勤奋，多一点理解
2楼2009-06-03 09:21:20
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jinzhongchong

木虫 (正式写手)
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clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 6-3 16:23
Sephadex LH-20柱也可以用不同比例的氯仿－甲醇作为流动相洗脱的，这种情况下类似于硅胶柱。分离效果也不错的
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3楼2009-06-03 09:55:23
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zinedine

新虫 (正式写手)
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Sephadex LH-20,可以用多种溶剂洗脱，但如果是进口凝胶的话，最好用色谱纯的试剂，这里有篇关于Sephadex LH-20洗脱剂的文献，希望对你有帮助Sephadex_LH-20应用实例.pdf
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4楼2009-06-03 19:38:54
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jmq0535

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karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 12-5 01:32
关于Sephadex LH-20有专门使用说明，这个材料可以使用多种溶剂洗脱，如果的你样品溶解性很好的话可以使用甲醇洗脱的，楼主需要注意的是该材料在不同的溶剂里面的膨胀系数是不同的。
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5楼2009-06-03 19:50:57
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liu33feng

可惜 我里面的组分也是未知哦 不知道是哪类物质
不过好像 易溶于氯仿  甲醇里不太好溶
大家看用什么溶剂好点
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6楼2009-06-03 23:59:18
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hugang2004_2000

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LH20 用氯仿甲醇洗的时候，凝胶的分离原理不是分子筛吗？为什么大家都关注极性而没有人说分子量大小的影响呢？
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7楼2009-12-04 14:25:13
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hugang2004_2000

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引用回帖:
Originally posted by jinzhongchong at 2009-6-3 09:55:
Sephadex LH-20柱也可以用不同比例的氯仿－甲醇作为流动相洗脱的，这种情况下类似于硅胶柱。分离效果也不错的

正相洗脱剂氯仿甲醇的条件下，凝胶的分离原理不是分子筛吗？这种情况下与硅胶柱类似，是哪方面的类似？分离效果还是什么？原理如此不同，分离效果怎么还会相似呢？
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8楼2009-12-04 14:34:02
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