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田亚敏

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达 已有1人参与

诱导的蛋白质破碎离心后大部分都在沉淀里，上清的量很少，是怎么回事？

@youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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1楼 2019-09-05 09:04:22
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
包涵体蛋白，换表达载体，低温诱导

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2楼2019-09-05 10:43:47
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有做预实验吗？小体积，摸索一下IPTG浓度，诱导温度及时间，如果确实是包涵体表达，可能优化也不一定有用，很多时候包涵体复性以后没有什么影响的。
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3楼2019-09-07 08:04:11
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田亚敏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2019-09-07 08:04:11
没有做预实验吗？小体积，摸索一下IPTG浓度，诱导温度及时间，如果确实是包涵体表达，可能优化也不一定有用，很多时候包涵体复性以后没有什么影响的。

这个做过了

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4楼2019-09-07 08:20:22
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田亚敏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-09-05 10:43:47
包涵体蛋白，换表达载体，低温诱导

好的

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5楼2019-09-07 08:35:34
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