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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主

[交流] 转化出现问题

质粒转化JM109长得慢是怎么回事？
别人给的一个质粒，AMP抗性，我用来转化JM109后，经过14小时还没长斑，但是经过20小时就会长很多大小不均一的斑，小的斑并非是卫星菌落，但是扎斑保存AMP平板时会发现，小的斑没有长，大的斑会长。这是为什么呢?

感受态效率没有问题，转别的质粒或连接产物的话，长得满满一平板，并且12个小时就OK。

[ Last edited by rainwander on 2009-6-2 at 14:35 ]
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
1楼 2009-06-02 09:27:28
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tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
感受态有问题不？感受态效率如何，大肠杆菌一般过夜就能长， 20小时长出来考虑有被污染的可能。再试一下
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2楼2009-06-02 09:30:14
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amp平板是不是浓度太高了，小的就不要管了，鉴定大的就行。
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金币是赌出来的
3楼2009-06-02 09:44:07
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longxiange520

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是amp浓度太高，要不后来长大是污染了的！
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4楼2009-06-02 09:45:34
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DLLB

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般氨苄抗生素超过20小时就失效了，所以长出的是杂菌
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5楼2009-06-02 10:28:02
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wuer413023

至尊木虫 (文坛精英)

没事领金币
??ing
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上邪!我欲与君相知，长命无绝衰。山无陵，江水为竭，冬雷震震，夏雨雪，天地合，乃敢与君绝！
6楼2009-06-02 10:36:49
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yet

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也觉得经过20小时长出来应该考虑有被污染的可能，不过你还是再试一下吧
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7楼2009-06-02 11:17:09
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ytetyio09

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
To high concerntration for AMP, or some problem with your competent cell, check the big transformants to be sure they harbor the plasmid you want.
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8楼2009-06-02 16:31:19
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ilaveu

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by DLLB at 2009-6-2 10:28:
一般氨苄抗生素超过20小时就失效了，所以长出的是杂菌

原来这样子啊
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9楼2009-06-02 17:22:47
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xmchen1015

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能你的质粒对菌的生长有影响
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10楼2009-06-02 17:23:35
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