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lfood

新虫 (初入文坛)

[交流] Re:【求助】Sphadex G100漏胶,请问如何处理?

用Sphadex G100分离蛋白一段时间后,发现有胶填料颗粒从洗脱液中流出(柱子下端的膜是刚换的,没有破)。调整了一下蠕动泵和洗脱液流速,虽然比以前低了,但还是漏胶。我仔细检查后发现胶中有许多絮状的悬浮物,可能是蛋白样品中的杂质(如脂类物质),我想可能是这些悬浮物导致柱阻力过大,才漏胶的。
请问谁有办法清洗Sphadex G100啊!十分感谢!!相当期盼!!
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wfjbioon

铁杆木虫 (正式写手)


lfood(金币+1,VIP+0):谢谢 6-7 10:21
那是下面的滤片漏了。有可能你的柱压太高。
建议放双层滤膜,同时胶进行0.5NHCl酸洗处理后重新装柱。
看着你怎么觉得这么眼熟啊?
3楼2009-06-01 22:03:52
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wangquande

铁杆木虫 (正式写手)


lfood(金币+1,VIP+0):你很有意思,谢谢 6-7 10:22
希望知道的可以帮楼主解答!
2楼2009-06-01 15:20:06
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wfjbioon

铁杆木虫 (正式写手)


lfood(金币+1,VIP+0):谢谢 6-7 10:21
如果是蛋白质类物质,可以用8M尿素或6MGuCl2进行处理;
如果是脂类物质,可以加入SDS稍许加热后漂洗,最后用纯化水漂洗。
看着你怎么觉得这么眼熟啊?
4楼2009-06-01 22:06:13
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lfood

新虫 (初入文坛)

问题已解决

问了几位老师,终于找到问题了,是G100染菌了,被降解成了小片断,因此会从膜中漏出。
提醒大家:柱子不用后应将胶及时回收,并添加防腐剂。
5楼2009-06-07 10:27:14
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