| 查看: 1143 | 回复: 1 | ||
[求助]
乳酸菌敲除 LiAc-DTT法
|
|
参考文献方法。 1%接种于1%甘氨酸的MRS培养基中， 4小时后取出， 冰浴30min， 以100 mM LiAc, 10 mM DTT, 0.6 M sucrose, and 10 mM Tris-HCl, pH 7.5室温下处理30min。 用一下溶液洗涤 bidistilled water 2.0ml, bidistilled water 1 ml, 50 mmol/l EDTA 1 ml, bidistilled water 1 ml, 0.3 mol/l sucrose 1 ml, 0.3 mol/l sucrose 最后重悬于0.3 mol/l sucrose 我的问题： 1这个方法有没有什么问题 2溶液配制 100 mM LiAc, 10 mM DTT, 0.6 M sucrose, and 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 LiAc于ddH2O溶解后，如何调pH。必须用醋酸吗?如何灭菌？？有说过滤膜的，也有说121℃ 15min的。 DTT用ddH2O溶解后，过滤膜，分装到1.5mL EP管，放在-20℃冰箱。之后发现有的是管澄清透明，有点是白色的。 以上所有溶液都是调到pH 7.5吗 加甘氨酸的MRS培养基配置方法：0.5M的蔗糖、1%甘氨酸是直接加到MRS中跟着一起灭菌吗??还是分开配置，过滤除菌后再跟灭菌好的MRS混合？？@biostar2009 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有144人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
2楼2019-08-24 15:12:42
40