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legend0463

金虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR的问题

我要做RT-PCR扩增1Kb多的片段应该注意什么问题呢?(包括在试剂的选择、引物的设计、操作的步骤上……)
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qqsvery

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
搞清楚RT-PCR是指什么?逆转录PCR还是实时荧光定量PCR?两者大不同!
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
5楼2010-01-22 22:52:07
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

非常泛的问题……
其实,如果你了解了RT-PCR每一步的背后的原理,你就能有相应的对策去克服困难了
2楼2009-06-01 11:07:26
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longxiange520

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
基本上还好解决的,1kb应该还好的,延伸的时间稍微长一点就可以了!
3楼2009-06-01 11:12:18
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amilie030312

金虫 (正式写手)

长度不是问题,但是具体到细节上就太多了,你做已知基因就好说了,直接找人家用什么引物做的而就用人家的体系做就行了,如果做未知基因的引物是需要好好设计的,具体要求网上一搜一大堆,好好学习一下吧,别盲目的就开始实验,准备工作都做好了再做更节省时间。
4楼2009-06-01 14:57:58
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