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Tengly

新虫 (初入文坛)

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[求助] 大鼠软骨细胞的II型胶原免疫组织化学染色

最近在做大鼠原代细胞的分离与鉴定，包括甲苯胺蓝染色和II型胶原的鉴定，这个II胶原的鉴定，我是爬片、4%多聚甲醛固定、0.5%TritonX-100通透、5%山羊血清封闭，一抗4度过夜，二抗暗室孵育1h，但是在荧光显微镜下看不到颜色。
我看很多文献，在这个操作的基础上还要在用DAB和苏木素复染。
问题一：为什么附完一抗二抗荧光显微镜下却观测不到呢？（二抗是带荧光的）
问题二：为什么后面要用那两个染色剂染呢？

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1楼 2019-08-12 16:56:21

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