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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求教关于测定蛋白酶酶活
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白珍建

木虫 (小有名气)

[交流] 求教关于测定蛋白酶酶活

我现在做酶的提取实验，用紫外吸收法测酶活，为什么吸光度老是测出负数来？

[ Last edited by amisking on 2009-5-30 at 12:08 ]
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1楼 2009-05-29 21:05:31
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
负数很正常，你可以稀释对照或者换其他的！
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
2楼2009-05-29 21:20:46
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
空白没有搞对
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3楼2009-05-29 22:47:55
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biogefart

木虫 (著名写手)

提高酶浓度或者降低底物浓度

试试看吧
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闹太套
4楼2009-05-29 23:30:28
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白珍建

木虫 (小有名气)
提高酶浓度我试了，能解决负数问题，
可测酶活不是要保证有足够的底物吗？
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5楼2009-05-30 08:54:24
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gechunhui

铜虫 (正式写手)
对照有问题
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6楼2009-05-30 12:02:33
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delia1013

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是对照不对吧，可以拿空气作对照，测出是负值就转化成正的！
底物浓度应该是要远大于酶浓度的啊，应该调整用酶的量~
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7楼2009-05-30 15:17:37
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白珍建

木虫 (小有名气)
对照也是设计好的，拿空气做对照就不对了吧，以前酶量不多的时候出现负数的情况多些，后来加大酶量，负数的情况少了，可还是有负数，怎么也想不出原因来
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8楼2009-05-30 22:11:21
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jinxiaoli9

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你是在275nm下测得吗？用的对照是什么啊？问题很可能出在对照上。我也做这个
赞一下(1人) 回复此楼
简单、宁静。
9楼2009-10-07 10:40:09
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
Originally posted by 白珍建 at 2009-5-29 21:05:
我现在做酶的提取实验，用紫外吸收法测酶活，为什么吸光度老是测出负数来？

[ Last edited by amisking on 2009-5-30 at 12:08 ]

这纯粹是实验操作细节问题！！
啥叫 用紫外吸收法测酶活  ，
你把具体的操作写出来，别人才能更好滴帮助你。
做实验的人，连问问题都不知道怎么问？！！！！！！

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-7 at 11:07 ]
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
10楼2009-10-07 11:05:29
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