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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hzfeng612

甲醇-水梯度洗脱 甲醇比例逐渐加大 最后用纯甲醇冲
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11楼2009-09-12 08:11:17
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主救

金虫 (正式写手)

海阔天空
★ ★ ★
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karl2100(金币+2,VIP+0):多谢提供！ 9-22 22:30
目前，看到园子谈到色谱柱冲洗的问题。我来谈谈我自己的一点意见，主要针对的反向色谱柱而讲的。
1.一般情况都是冲洗色谱柱20倍柱体积，具体可以这样计算，根据柱内径和柱长算出色谱柱内体积。短柱一般时间就是30分钟就可以了啊！流速是1.0毫升每分钟。
2.冲洗色谱柱最好在分析结束后，用流动相冲洗到基线平稳，然后用10%左右的有机溶剂冲洗色谱柱，主要是冲洗干净流动相中的缓冲盐。然后用100有机溶剂冲洗。最好是梯度变化冲洗。分析物可能为一些能溶解在水中，有些需要用纯溶剂才能完全去除。如果分析时间紧迫一定要把盐分冲洗干净，一般情况不要用纯水冲洗色谱柱，特别是反向柱的填料的键合集团容易折断，对色谱柱造成损伤。
3.色谱柱被使用在某种程度上就是开始被污染了，所以色谱柱的寿命和我们使用的情况有很大的关系。虽然被污染但是对我们分析目标物没有造成影响我们也就是认为还能用。
4.前面谈到的不管用什么溶剂一定要加入一定比例的用机溶剂，主要是考虑到一些疏水基团在有机溶剂里面容易伸展利于冲洗其包藏的杂质等。当我们的色谱柱在压力和柱效下降时，我可以拆开泵近端柱头的螺丝取出筛板，清洗筛板以及观察里面的填料，如填料污染严重，就要进行挖取一部分被污染的填料然后用其他废弃的柱子相同填料来填补，用新的筛板或清洗好的筛板拧好螺丝。然后冲洗观察柱压变化和测试柱效等。
希望大家提出更好的建议和办法。
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海阔天空
12楼2009-09-22 22:22:49
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fanmei

金虫 (小有名气)

非常感谢

非常感谢主教的指点，以前只是知道冲洗多长时间，至于冲洗的理论知识却不知道，有你这一席话，胜读半年的书啊，谢谢
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13楼2009-09-23 08:27:05
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竹轩书童

至尊木虫 (职业作家)

首席魔法师
★
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我的建议是：反过来接冲洗一下。最好也设个梯度洗脱。甲醇——水。最后在甲醇中加入适量的异丙醇，用甲醇-异丙醇再冲冲……
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14楼2009-09-24 12:16:23
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jsedc

银虫 (小有名气)
★
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C18-硅胶的用甲醇和水大流量冲，先调节甲醇90%冲半小时，再调节水90%冲半小时
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15楼2009-09-25 10:24:58
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yanan675

银虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):多谢提供！ 2010-04-03 21:52
如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
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死机并不可怕，可怕的是没有存档！
16楼2010-04-02 23:43:27
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可乐=枫

荣誉版主 (知名作家)

简单快乐

优秀版主优秀版主
★
karl2100(金币+1):谢谢参与交流！ 2010-04-05 21:16
引用回帖:
Originally posted by 耗子怕猫 at 2009-05-30 07:45:49:
反相色谱柱是不是C18？用醇洗，甲醇乙醇均可

貌似没有听说用乙醇洗色谱柱的，也没有听说过有色谱乙醇。


色谱柱的清洗过程跟重生过程不一样，如果仅仅是洗前次进样的残留，可以根据流动相的比例组成冲洗一段时间（如果含缓冲盐的话，直接用水相代替原先含盐的水相即可），一般冲洗20个柱体积。然后在过渡到封柱比例的甲醇、乙腈溶液即可。

如果是重生则比较麻烦，楼主可以在网上搜搜色谱柱重生相关信息。
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做事认真就好，做人快乐就好。
17楼2010-04-05 10:48:19
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