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清洗反相柱 已有1人参与
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| 各位高手，我用的是反相色谱柱，现在住效好低，我想清洗一下柱子，怎么洗？ |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+2,VIP+0):多谢提供！ 9-22 22:30
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karl2100(金币+2,VIP+0):多谢提供！ 9-22 22:30
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目前，看到园子谈到色谱柱冲洗的问题。我来谈谈我自己的一点意见，主要针对的反向色谱柱而讲的。 1.一般情况都是冲洗色谱柱20倍柱体积，具体可以这样计算，根据柱内径和柱长算出色谱柱内体积。短柱一般时间就是30分钟就可以了啊！流速是1.0毫升每分钟。 2.冲洗色谱柱最好在分析结束后，用流动相冲洗到基线平稳，然后用10%左右的有机溶剂冲洗色谱柱，主要是冲洗干净流动相中的缓冲盐。然后用100有机溶剂冲洗。最好是梯度变化冲洗。分析物可能为一些能溶解在水中，有些需要用纯溶剂才能完全去除。如果分析时间紧迫一定要把盐分冲洗干净，一般情况不要用纯水冲洗色谱柱，特别是反向柱的填料的键合集团容易折断，对色谱柱造成损伤。 3.色谱柱被使用在某种程度上就是开始被污染了，所以色谱柱的寿命和我们使用的情况有很大的关系。虽然被污染但是对我们分析目标物没有造成影响我们也就是认为还能用。 4.前面谈到的不管用什么溶剂一定要加入一定比例的用机溶剂，主要是考虑到一些疏水基团在有机溶剂里面容易伸展利于冲洗其包藏的杂质等。当我们的色谱柱在压力和柱效下降时，我可以拆开泵近端柱头的螺丝取出筛板，清洗筛板以及观察里面的填料，如填料污染严重，就要进行挖取一部分被污染的填料然后用其他废弃的柱子相同填料来填补，用新的筛板或清洗好的筛板拧好螺丝。然后冲洗观察柱压变化和测试柱效等。 希望大家提出更好的建议和办法。 |
12楼2009-09-22 22:22:49
3楼2009-05-30 07:45:49
4楼2009-05-30 09:13:48
bioengineercat
木虫 (著名写手)
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5楼2009-05-30 12:57:15