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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 如何用酶标仪测定菌的生长曲线
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拿铁小番茄

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何用酶标仪测定菌的生长曲线 已有1人参与

求助各位大佬，酶标仪我不太会用，怎样测菌的生长曲线呢？96孔板中是加完培养液然后在接入菌种么？孔板需要怎样灭菌？

@天使托 发自小木虫Android客户端
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1楼 2019-07-24 17:28:53
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sannny

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶标仪只是一个光度计而已。你需要做的事在合适的培养容器中培养你的细菌，然后定时取出相同体积的菌液用酶标仪测OD。然后在EXCEL中做散点图（OD对时间作图）

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2楼2019-07-24 17:32:22
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sannny

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sannny at 2019-07-24 17:32:22
酶标仪只是一个光度计而已。你需要做的事在合适的培养容器中培养你的细菌，然后定时取出相同体积的菌液用酶标仪测OD。然后在EXCEL中做散点图（OD对时间作图）

至于用多大的波长，根据你的菌的不同自己选择，比如大肠用600的。

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3楼2019-07-24 17:34:04
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Albert冰辰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sannny at 2019-07-24 17:34:04
至于用多大的波长，根据你的菌的不同自己选择，比如大肠用600的。
...

您好！请问如果我在培养基里面另外添加了某种有颜色化合物，那么我应该怎么用OD来表示细菌密度呢？是直接测菌液OD嘛？还是要用菌液OD减去单独只加这种化合物的溶液的OD呢？

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4楼2019-07-25 05:15:34
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sannny

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Albert冰辰 at 2019-07-25 05:15:34
您好！请问如果我在培养基里面另外添加了某种有颜色化合物，那么我应该怎么用OD来表示细菌密度呢？是直接测菌液OD嘛？还是要用菌液OD减去单独只加这种化合物的溶液的OD呢？
...

可以按你说的做空白对照。但我们测的是浊度，其实颜色干扰不大。你可以用加色素的培养基做空白，也可以只用不加色素的培养基做空白。

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5楼2019-07-25 06:24:13
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Albert冰辰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sannny at 2019-07-25 06:24:13
可以按你说的做空白对照。但我们测的是浊度，其实颜色干扰不大。你可以用加色素的培养基做空白，也可以只用不加色素的培养基做空白。
...

您好！非常感谢您的建议，我们今天做了只加培养基和化合物的对照，发现的确有OD，那请问我们在计算浓度的时候，是否应该减去这个数值呢？还是说应该再测一次只加培养基的OD，然后用加培养基和化合物的OD减去只加培养基的OD，得到化合物的OD，然后在后面测生长曲线的时候，把得到的数值统一减去这个化合物的OD呢？

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6楼2019-07-26 05:14:38
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
我想知道你是怎么测的？如果是想测化合物的干扰情况，应该用只有培养基的作为对照。然后检测加了化合物的组。你的情况可以用培养基加色素作为空白。

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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
7楼2019-07-26 06:28:20
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梁爽爽11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sannny at 2019-07-24 17:32:22
酶标仪只是一个光度计而已。你需要做的事在合适的培养容器中培养你的细菌，然后定时取出相同体积的菌液用酶标仪测OD。然后在EXCEL中做散点图（OD对时间作图）

请问可以用无菌的一次性孔板培养细菌，然后定时拿到酶标仪上测吗？

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8楼2020-08-23 18:30:39
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hnsfdj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 梁爽爽11 at 2020-08-23 18:30:39
请问可以用无菌的一次性孔板培养细菌，然后定时拿到酶标仪上测吗？
...

请问你这个问题解决了吗？
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9楼2022-09-05 09:16:48
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