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打工小王仔

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳maker最小的几条带跑不出来 已有4人参与

最近提取完质粒后双酶切后电泳时最小的条带老是跑不出来,maker最小的带也跑不出来,请问各位大侠是什么原因,我跑的是1%的琼脂糖浓度,用的是5000的maker,目的条带在500左右
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寻找小甜甜

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-23 21:53:04
电泳条件不对吧,500条带,如果是恒压,电压不能太大,电泳时间也要短点

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2楼2019-07-23 09:23:00
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寻找小甜甜

新虫 (初入文坛)

marker也没,条带估计跑出胶块了

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3楼2019-07-23 09:23:38
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打工小王仔

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 寻找小甜甜 at 2019-07-23 09:23:38
marker也没,条带估计跑出胶块了

我是用的120V的跑了30分钟

发自小木虫Android客户端
4楼2019-07-23 09:34:16
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-07-28 22:06:43
建议你用2%的琼脂糖试试,电泳时间和电压都没有问题。1%的胶的分离片段更大一些,如果你的载体片段大一的话,也可以用1.5的。另外,酶切体系可以做大一点,比如切1微克的质粒。
5楼2019-07-25 20:26:10
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匿名

用户注销 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-28 22:06:53
本帖仅楼主可见
6楼2019-07-27 18:43:27
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打工小王仔

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2019-07-25 20:26:10
建议你用2%的琼脂糖试试,电泳时间和电压都没有问题。1%的胶的分离片段更大一些,如果你的载体片段大一的话,也可以用1.5的。另外,酶切体系可以做大一点,比如切1微克的质粒。

谢谢

发自小木虫Android客户端
7楼2019-07-30 17:25:32
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据你的问题描述,建议更换2000的试试;如果还是出现这种情况,考虑可能是你的胶板配置不均一,电泳时间过长电流过大等原因
8楼2019-08-05 13:00:27
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qaz199018

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果marker其它条带也比较弱的话,换一下新配的电泳缓冲液试试
~~~
9楼2019-08-07 19:44:10
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

难道你是用水配胶
10楼2019-08-09 11:06:34
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