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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 电泳maker最小的几条带跑不出来
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打工小王仔

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳maker最小的几条带跑不出来 已有4人参与

最近提取完质粒后双酶切后电泳时最小的条带老是跑不出来，maker最小的带也跑不出来，请问各位大侠是什么原因，我跑的是1%的琼脂糖浓度，用的是5000的maker，目的条带在500左右
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1楼 2019-07-23 09:11:49
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寻找小甜甜

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-23 21:53:04
电泳条件不对吧，500条带，如果是恒压，电压不能太大，电泳时间也要短点

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2楼2019-07-23 09:23:00
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寻找小甜甜

新虫 (初入文坛)
marker也没，条带估计跑出胶块了

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3楼2019-07-23 09:23:38
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打工小王仔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 寻找小甜甜 at 2019-07-23 09:23:38
marker也没，条带估计跑出胶块了

我是用的120V的跑了30分钟

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4楼2019-07-23 09:34:16
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-07-28 22:06:43
建议你用2%的琼脂糖试试，电泳时间和电压都没有问题。1%的胶的分离片段更大一些，如果你的载体片段大一的话，也可以用1.5的。另外，酶切体系可以做大一点，比如切1微克的质粒。
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5楼2019-07-25 20:26:10
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-28 22:06:53
本帖仅楼主可见
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6楼2019-07-27 18:43:27
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

打工小王仔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2019-07-25 20:26:10
建议你用2%的琼脂糖试试，电泳时间和电压都没有问题。1%的胶的分离片段更大一些，如果你的载体片段大一的话，也可以用1.5的。另外，酶切体系可以做大一点，比如切1微克的质粒。

谢谢

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7楼2019-07-30 17:25:32
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据你的问题描述，建议更换2000的试试；如果还是出现这种情况，考虑可能是你的胶板配置不均一，电泳时间过长电流过大等原因
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8楼2019-08-05 13:00:27
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qaz199018

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果marker其它条带也比较弱的话，换一下新配的电泳缓冲液试试
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~~~
9楼2019-08-07 19:44:10
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
难道你是用水配胶
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10楼2019-08-09 11:06:34
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