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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于DNA复制还是表达？
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appleren

木虫 (著名写手)

[交流] 关于DNA复制还是表达？

我学化学，所以懂很少，想请教一下什么情况下一段较长的DNA导入大肠杆菌后会表达成蛋白？而什么情况下又只是在大肠杆菌中被复制

[ Last edited by amisking on 2009-5-28 at 13:43 ]
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1楼 2009-05-28 12:49:16
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tianhang

新虫 (小有名气)

我所了解的是这样的

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 5-28 15:02
将目的DNA插入复制型克隆质粒DH5a，转入大肠杆菌后进行复制，扩增
将目的DNA插入表达型质粒BL21，转入大肠杆菌后则进行表达成蛋白~
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2楼2009-05-28 13:41:16
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ilaveu

木虫 (著名写手)
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 5-28 15:03
引用回帖:
Originally posted by tianhang at 2009-5-28 13:41:
将目的DNA插入复制型克隆质粒DH5a，转入大肠杆菌后进行复制，扩增
将目的DNA插入表达型质粒BL21，转入大肠杆菌后则进行表达成蛋白~

DH5a和BL21都是菌株，不是质粒！

改为如下表达吧：
将目的DNA插入复制型质粒载体，转入大肠杆菌DH5a后进行复制，扩增
将目的DNA插入表达型质粒载体，转入大肠杆菌BL21后则进行表达成蛋白
当然目的基因都必须有正确的启动子才行
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3楼2009-05-28 13:51:17
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anik

银虫 (正式写手)
2楼的是对的。。。。
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4楼2009-05-28 15:02:05
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)
★
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据我所知你们说的都是很小的一个方面。
不仅仅只有大肠杆菌有表达与克隆的功能，还有很多其他的菌株。并且表达也不是仅仅有启动子就可以的，还要有很多的调控序列的。
总之，一两句话说不清楚的吧，如果又需要可以跟我交流。
邮箱：dahaiyiguzhou@163.com
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5楼2009-05-28 15:11:38
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yuweibest

木虫 (正式写手)
当然要想表达也要有条件！像加入些表达促进剂之类的！IPTG比较经典的！
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6楼2009-05-28 23:16:12
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wangshui

至尊木虫 (著名写手)
★
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这个问题真不是一两句话能够说清楚的，基因的转移与表达是一个大领域。如果仅是为了某一目的的实验，建议找专业公司去设计质粒。
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7楼2009-05-29 08:28:11
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