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20040359

金虫 (小有名气)

[交流] 启动子构建,求助!!

我正在构建一个启动子到植物双元载体上,设计特异性引物从植物基因组里做PCR,寄希望得到我需要的2.5kb的片段。可是老是PCR后没东西···
不知道为什么···
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20040359

金虫 (小有名气)

谢谢各位秀友的帮助啊!!
5楼2009-06-01 15:27:13
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议站内搜索下,问这类问题的太多了,应该搜得到答案。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-05-28 11:01:46
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ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
从基因组PCR都出不来
首先是不是你的基因组质量不高啊?
引物特异性足够强吗?可以设计长一点的引物,40bp的
降低一下退火温度试一下
3楼2009-05-28 11:54:16
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anik

银虫 (正式写手)

你可以从表达载体直接酶切阿,PBI121的35S 及NOS 都可以切下来的
4楼2009-05-28 15:06:57
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