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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 求助指点HRP-H2O2电化学体系的问题 已有2人参与

大家好,我刚开始做电化学方面,有些问题向大家请教下。我在金电极上通过层层修饰结合了HRP标记的抗体,想通过DPV方法在底物过氧化氢-氢醌溶液中进行检测,从而达到对靶标DNA定量检测的目的。实验过程中遇到一些问题,希望得到大家指点。
1. DPV底物溶液为在0.1M PBS中含一定量的氢醌和过氧化氢。我先用PBS溶液氢醌(现配现用),然后将过氧化氢加进去,随之通氮气15min以上备用。不知道这样做对不对?请大家指点。
2. 带有HRP标记的金电极,浸泡到上述DPV溶液中,需要反应一段时间再测DPV还是立即测试?平行做几根金电极,是否可以用同一个DPV溶液测试,还是每根电极用不同的DPV溶液?因为随着时间延长,DPV测试溶液会从无色变成粉红色。
由于刚接触电化学,很多东西都不懂,希望得到大家的指教,谢谢!@langzhizhou
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lixinlx79

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我不做电化学,我是生物化学,但我做过HRP-H2O2的反应,这个反应速度是相当快的,尤其是你的溶液颜色有变化,说明很可能应尽快进行,祝你顺利!
2楼2019-07-20 15:28:44
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sunlirui1993

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

氢醌极易氧化,在密封避光的条件下也不能长久保存,DPV的话,我是配好溶液马上就测的,测平行的话,只要溶液一样就可以吧,但是如果溶液易氧化的话,就需要控制每根电极做DPV的时候要一致,不能氧化
3楼2020-06-22 17:56:32
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