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poog502

木虫 (正式写手)

[交流] 求助:花芽分化的信号转导研究

各位达人大家好!

老板给偶定了课题是做茶花花芽分化机理的研究,我设计了生理方面的实验,可重点在茶花花芽分化机理的信号转导机制研究这部分。

实验背景:07年众多研究表明,在合适的栽培条件下,植物叶子感受到外界信号刺激使得FT基因表达为FT蛋白,当FT蛋白通过韧皮部转移至茎顶端开始诱导花芽分化。通过对拟南芥、水稻、南瓜以及木本植物毛白杨等地研究都证明了FT蛋白即为诱导植物开花的“成花素”。这使得“成花素”假说成真。

我所研究的茶花在组培方面存在很多问题,再生体系还没有建立起来。现在严重郁闷中,不知道该如何开展课题研究了。

问题:希望能从几个方面得到您的指点:
1、怎么在木本植物中检测茎顶端的FT蛋白?我用赤霉素、高温、不同光质诱导了FT基因的表达,但是怎么才能量化这个指标?如用绿色荧光蛋白标记FT蛋白的方法怎么在茶花中实现(组培再生体系尚未建立的前提下)?
2、怎样通过FT基因得知FT蛋白的表达量?
本人刚从植物生理转到分子生物学领域,十足的菜鸟,菜鸟中的菜鸟。希望各位达人能给些宝贵意见。万分感谢!!!
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ycg2006

金虫 (正式写手)


poog502(金币+1):谢谢参与
我也是菜鸟
2楼2009-05-27 08:26:06
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
poog502(金币+1):谢谢参与
poog502(金币+1,VIP+0): 5-31 08:07
我觉得可以先克隆茶花FT基因,然后做表达模式(定量PCR),进而分析其是否与花芽分化有关
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
3楼2009-05-27 10:50:46
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qiusuo

铁杆木虫 (著名写手)


poog502(金币+1):谢谢参与
再生体系的建立非常关键!
4楼2009-05-27 13:17:36
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qiusuo

铁杆木虫 (著名写手)


poog502(金币+1,VIP+0): 5-31 08:07
克隆FT基因,进行原位杂交。在茶花上。

[ Last edited by qiusuo on 2009-5-27 at 14:24 ]
5楼2009-05-27 13:18:55
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qiusuo

铁杆木虫 (著名写手)

不一定正确啊
6楼2009-05-27 14:26:20
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poog502

木虫 (正式写手)

十分感谢各位虫友关注,十分感谢香菱儿和qiusuo的中肯建议,我会及时就这些信息狂充电后希望能和二位交流!!!
7楼2009-05-31 08:10:51
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poog502

木虫 (正式写手)

经高人指点提出应用Real Time PCR法进行mRNA表达量的相对定量分析,同时提取蛋白做western印迹杂交解决上述问题中FT蛋白的时空表达。十分中肯!!!高人就是高人!写出来和大家交流下hehe

[ Last edited by poog502 on 2009-6-1 at 16:25 ]
8楼2009-06-01 16:23:23
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qiusuo

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
western要制备抗体啊,FT蛋白有没有?好制备吗?
9楼2009-06-04 20:06:25
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poog502

木虫 (正式写手)

有。。。但我还没搞好
10楼2009-06-15 09:31:59
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