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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 电转MSC细胞时第一次做电转效率60%，再做就怎么都重复不出来了。请大家帮我分析分析。
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wukejing

金虫 (正式写手)

[求助] 电转MSC细胞时第一次做电转效率60%，再做就怎么都重复不出来了。请大家帮我分析分析。 已有1人参与

电转MSC细胞时第一次做电转效率60%，再做就怎么都重复不出来了。因为两次做间隔有点久，不知道哪里不对。后面重复，每次细胞死很多，还会出现白色黏糊状的东西（可能是DNA电出来了），留下的细胞根本长不起来。我的实验条件是这样的：电转UMSC细胞，电转条件是：250 v,950uF，200Ω，4mm电转杯，细胞量1.0*106个，BIO-RAD Gene Pulser Xcell电转仪。质粒是invitrogen中提质粒
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坚强、乐观、自信、豁达！
1楼 2019-07-09 16:08:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mql_csu

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 花花贝 at 2019-07-22 22:32:53
请教下 电转后干细胞还能维持干性吗？

猜测：电转不会改变转录组吧，干细胞只要不是关键基因沉默和/或开启就还是干细胞呀！
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9楼2019-07-23 13:57:31
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普通回帖

mritang

新虫 (知名作家)
呵呵正事没人回答！实验有记录啊？

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没有努力，再好的远见也只有是一个不切实际的梦想。努力不懈，才能达到有价值的目标。
2楼2019-07-09 18:52:16
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wukejing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mritang at 2019-07-09 18:52:16
呵呵正事没人回答！实验有记录啊？

谢谢，做出来了
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3楼2019-07-12 14:06:16
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mritang

新虫 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wukejing at 2019-07-12 14:06:16
谢谢，做出来了...

做生物研究没必要问他人。遇见问题看文献，拆开你要的数据最后组合你会发现很多问题。

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没有努力，再好的远见也只有是一个不切实际的梦想。努力不懈，才能达到有价值的目标。
4楼2019-07-12 14:54:54
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prthefu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wukejing: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-07-20 22:09:38
楼主，电转后白色粘稠状物质是死细胞，不是DNA。另外，看你说到后面又做出来了，那你找到是哪里的问题吗？电转条件还是其他的原因？
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
5楼2019-07-15 11:32:55
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wukejing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by prthefu at 2019-07-15 11:32:55
楼主，电转后白色粘稠状物质是死细胞，不是DNA。另外，看你说到后面又做出来了，那你找到是哪里的问题吗？电转条件还是其他的原因？

细胞的状态问题，另外细胞要在80%左右电转，效率比较好
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6楼2019-07-20 22:07:56
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wukejing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mritang at 2019-07-12 14:54:54
做生物研究没必要问他人。遇见问题看文献，拆开你要的数据最后组合你会发现很多问题。
...

好的，谢谢!也可以多沟通交流吗，毕竟角度不同，科学思维差不多
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7楼2019-07-20 22:08:53
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花花贝

金虫 (知名作家)
请教下 电转后干细胞还能维持干性吗？
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8楼2019-07-22 22:32:53
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wukejing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 花花贝 at 2019-07-22 22:32:53
请教下 电转后干细胞还能维持干性吗？

我们测了电转后的MSC细胞的表面marker还是的。
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10楼2019-07-25 17:11:41
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