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blh3000

木虫 (正式写手)

[交流] HL-60 细胞培养 已有3人参与

请教各位虫友:我用1640+20%FBS培养基养的HL-60细胞,从复苏到现在两周了,还没有长起来(我需要100万/ml),细胞碎片也很多,想交请教下大家,你们有没有遇到过这样的现象,该怎么样处理?!

[ Last edited by amisking on 2010-4-19 at 11:26 ]
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blh3000

木虫 (正式写手)

先谢谢啦!
2楼2009-05-26 14:10:55
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ECUST小熊

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+4): 2010-04-19 11:26
估计是细胞冻存时候除了问题或者你复苏的时候时间时间太长的原因。
如果里面还有不少细胞的话,可以消化下来转移至新的培养瓶里面试一试。如果细胞数目不多的话,很难长出来的。建议重新复苏,记得一定要在37最快的速度复苏。建议2人操作,一人预将热好的培养基转移培养瓶里,另一人将细胞在水浴锅里将细胞充分复苏后交给操作台里的就ok了。记得喷些酒精哦~~
不过我们都是采用10%的血清,不知道采用20%的会怎么样?
3楼2009-05-26 16:50:58
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blh3000

木虫 (正式写手)

我今天又看了下,10倍稀释后计数:80万个/ML,有12大瓶,但我们要打60只,200万个/只,养了好久了,都不知道还要多久才够!
4楼2009-05-27 15:44:39
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klosexs1987

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们也要做HL-60细胞方面的试验,,只是一直订不到细胞,,请问你们是在哪里买到的细胞啊,,急切寻求帮助啊。。。拜托!!!
5楼2010-04-17 21:27:05
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blh3000

木虫 (正式写手)

哈哈,我们是在中科院买的,但邮寄的不怎么好...建议自己去拿,哈哈!
6楼2010-04-19 08:58:35
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
细胞复苏的时候应该快速融化  动作一定要快  对了 20%的血清会不会高了还是  我也不懂  但是我用的是10%的 细胞长的很好
7楼2010-04-21 23:29:45
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