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0010030335

金虫 (小有名气)

[求助] 有没有哪位大神用过Qiagen(凯杰)的逆转录试剂盒?求帮助。 已有1人参与

有没有哪位大神用过Qiagen(凯杰)的逆转录试剂盒?求帮助。里面没有Random 引物和Oligo 引物。

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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从别的逆转录盒子里找,或者自己合成稀释到对应浓度,oligodt,random primer浓度20uM-50uM逆转录基本没问题

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2019更好更棒!
2楼2019-07-04 22:45:15
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0010030335

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2019-07-04 22:45:15
从别的逆转录盒子里找,或者自己合成稀释到对应浓度,oligodt,random primer浓度20uM-50uM逆转录基本没问题

找了Promega 试剂盒,但是里面引物的浓度单位是ug/ml,怎么换成uM 呢?

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3楼2019-07-05 08:40:08
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 0010030335 at 2019-07-05 08:40:08
找了Promega 试剂盒,但是里面引物的浓度单位是ug/ml,怎么换成uM 呢?
...

直接20ul体系加个1ul应该就没问题。算的话,两个都是浓度单位,uM等于umol/L,mol数等于质量m除相对分子量M,碱基平均相对分子量320左右,一条oligo的相对分子量等于320xbp大小。假设是一段20bp随机引物,换算就是x ug/mL=x/(320x20)umol/ml=x/(320x20)umol/10-3次L=1000x/(320x20)umol/L=1000x/(320x20)uM。每个碱基的相对分子量都是已知的,所以oligo的相对分子量是一个准确值,上边那个是估算。

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2019更好更棒!
4楼2019-07-05 12:27:03
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