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dapaosheng木虫 (著名写手)
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原核表达问题
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| 想用PBV220载体表达一个抗体基因，应该怎样做？ |
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2004371310
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| 在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法 以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增，获得366bp的核心蛋白基因片段。将其插入连接载体pMD18T vector中，酶切后再与表达载体pBV220连接，构建重组表达载体pBV220/HCVC。经鉴定后温度诱导表达，采用SDSPAGE电泳及Westernblot检测核心蛋白基因的蛋白表达。 结果 经温度诱导后获得目的基因的非融合表达，SDSPAGE电泳显示在14000u处有一表达条带；Westernblot结果显示其具有HCV抗原特异性。结论 丙型肝炎病毒核心蛋白基因成功表达，对临床诊断试剂和HCV基因疫苗的研制有一定的意义。 |
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