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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 我算是跟RNase干上了
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
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如果排除操作的原因,那么就有可能是目的样品里面含有的RNA太少,不知道你是如何检测没有提取出来的呢,如果是电泳,拿说明不了问题,如果是RT-PCR,也有可能是在这个过程中损失掉了,一步一步排查,good luck!
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52187644
11楼2009-05-26 12:22:35
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ECUST小熊

木虫 (正式写手)
★
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新买的枪头 离心管处理的很仔细.lz是用什么处理的啊？实在不行的话，直接买无RNase的枪头就可以了，不是很贵的，不需要处理并且普通枪头的处理很麻烦的。要确保里面没有一点点的气泡，应全部被DEPC水浸泡的，包括枪头尖的位置。
如果排除这个问题的话，还有就是前面提到的样品问题，或者RNA储备液的问题。
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12楼2009-05-26 12:35:51
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bbyu007

木虫 (正式写手)

应该是提取步骤需要优化，离心速度很重要，高或低都不好！

这是我提的：
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我是笨笨鱼~~~
13楼2009-05-26 13:19:43
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whiccer

金虫 (正式写手)
★
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再优化一下：操作过程严格，温度控制，无菌操作。
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14楼2009-05-26 13:42:29
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jiangyoushuai

金虫 (小有名气)
★
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不知道你提什么样品！要是组织的就用TRIZOL法就可以了。要是细菌或真菌，你就要选择合适的破壁方法了！
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运筹帷幄之中，决胜千里之外
15楼2009-05-26 15:09:17
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hulqi

金虫 (正式写手)
★
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有可能是你的样品被处理的过程中折腾的太厉害了，mRNA都降解了。我做的是细菌的mRNA提取，每次收完菌后直接放进-70度冰箱，连平时多次洗菌的步骤都省了。害怕降解啊。还好，我每次都提出来了~~~Good Luck
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16楼2009-05-26 17:31:03
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112976553

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你研钵怎么处理的，有没有通过DEPC水泡过呢，我马上也要开始做了，偶的神哦！ 你这样子的情况让偶很担心哇。
112976553 加QQ交流交流吧
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17楼2009-05-26 18:22:29
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guyue2885

银虫 (正式写手)
Shengjing  我是提的花蕾的RNA,第一次提的特别好  但是最近一个月不知道怎么一直没有成果~~我确定能提出来，唯一的注意是操作步骤，但发现越小心越出问题了~~
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18楼2009-05-26 19:42:40
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pmay

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
以前我刚开始提RNA的时候也是怎么都提不出来,也不知道什么地方出问题了,郁闷了很久,后来罢工一星期后再提竟然可以提的很好了,所以我觉得可能需要多练习吧,记得研磨的时候一定要带口罩,其他方面注意点,溶液都没有问题,那就离成功不远啦,加油~~
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19楼2009-05-26 21:04:46
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临风7071

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
实验中一定要少说话，勤换手套！勤擦手！
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20楼2009-05-26 23:01:22
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