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guyue2885

银虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 712946
注册: 2009-03-02
性别: GG
专业: 生物

[交流] 我算是跟RNase干上了

五月份来提取RNA已经五六次了，可是没有一次成功的，每一次都很认真很仔细，灭菌，DEPC浸泡，灭菌，手套一直换，Trizol 还有其他试剂盒还有自己配置的SDS法，没有一个出来条带的，全军覆灭！新买的枪头离心管处理的很仔细可是有一次game over 了
很郁闷，我不怕失败，我怕的是实验失败了竟然找不到在那个环节出现了漏洞
哎
明天听听答辩再好好想想了
真希望身边有个人指导一下~~

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1楼 2009-05-25 21:53:01

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amilie030312

金虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 644.8
帖子: 407
在线: 47.3小时
虫号: 296900
注册: 2006-11-18
专业: 动物遗传学

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎回帖交流！ 5-28 15:25

首先要看你要抽提的样品是什么样品，不同的样品需要不同的处理方式和保存后前处理方式，所以首先要知道你是做什么样品的的。再有，常规来讲RNA是比较好提的，其中细胞最好提，接下来是动物组织和植物组织，植物组织先去杂质，比如多酚多糖，去了杂质提取RNA就像提细胞那样简单了。对于动物组织就又有的分了，是不是难研磨的，是不是核糖核酸酶含量高的等等，都有的分的。如果你不差钱可以选择稍微有针对性一些的RNA抽提试剂盒。接下来操作之前要处理好你整个实验台面和是要要用到的管子和枪头，同样，不差钱可以选择已经处理好了的，超净台和枪啥的可以用Rnase ZAP去除一下RNA酶。再下来就是整个实验操作一定要快，而且常换手套，每次加样都还枪头。如果用T来抽那么一定在吸上清的时候宁可浪费点也不要把中间层吸上来，那可是DNA啊，污染了你还得去基因组DNA污染，所以宁可少吸也别污染。还有什么一下子没想起来，就先说这么多吧。