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药物标准曲线如何绘制???
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想做一个药物的标准曲线,用PBS做溶剂,紫外280nm有吸收。第一次做,过程中有几个问题想请教一下: 1.我们实验室用的是酶标仪,可以用比色皿做紫外检测,不知和分光光度仪是否存在差别?由于“空白调零”这个我不知道怎么弄,所以每次数据都是先测一个PBS空白组的吸光度,后面药物的数据减去空白组,可否? 2. 紫外检测最低只测到0.5-1ug/ml左右的浓度,再低吸光度值就忽高忽低了(与PBS对比),最高检测在1mg/ml左右,再高吸光度就over了。要求检测的浓度大概是20ug/ml左右,所以这样的浓度范围做出的曲线可以用吗? 3. 一般都是以吸光度0.2-0.8范围的浓度做曲线,可是我的浓度在50ug/ml时才0.2,意思起点以50开始?即横坐标是根据吸光度(0.2-0.8)对应的浓度选择,还是取最低检测浓度梯度增加来作为横坐标呢? 4.对于吸光度,是原始数据作图,还是减去空白组PBS的吸光度作图呢,即0.2-0.8是指哪个吸光度? 谢谢大家! |
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