| 查看: 1142 | 回复: 1 | ||
xydlengyue金虫 (正式写手)
|
[求助]
接合转移后筛选单交换子问题
|
|
rt 本人最近在做奇异变形杆菌的一个基因的敲除 前面都蛮顺利的 然后到了接合转移后筛选单交换子这一步了 进行了无数次 就是无法pcr出两条长短不一的条带。 我是这么做的 把鉴定正确的连接到t载体上的包含自杀性的缺失基因（连接产物在感受态细胞x7213中）作为供体菌，野生株作为受体菌 摇到2个浓度差不多时候 各取100微升 放入500微升的lb中 不加抗生素 过夜摇菌 然后取100微升涂到氯霉素抗性平板上 挑选单菌落在加了氯霉素的lb中摇菌鉴定 然后pcr鉴定（酶是2xestaq 蓝色的） 但是一直只有一条带（没有缺失的） 求助为什么 奇异变形杆菌之前在加了氯霉素的lb中不生长 但是结合转移了之后就可以生长 按理说是转进去了 但是为什么pcr鉴定不出来 只能鉴定出来野生型的那条带 没有缺失的 心态快炸了 |
回复此楼» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有105人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
xydlengyue
金虫 (正式写手)
| . |
2楼2019-06-26 16:19:00