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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞在材料上生长的活死染色让背景材料着色问题
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水?W狐狸

铁虫 (小有名气)

[求助] 细胞在材料上生长的活死染色让背景材料着色问题 已有1人参与

本人做的是生物材料，蛋白质薄膜，在上面培养了PC12细胞，我们现在使用的活死细胞染料是Calcein-AM/PI，但是活染料感觉很容易把蛋白材料染上色，让上面的细胞和背景材料的颜色亮度没有太大差别，细胞就不太看得清了，想请教一下大家有没有什么好办法。我最近刚知道一种invotregen的叫做 alarmar blue assay的染料也可以用作活死染料， 有没有其他有什么染料作为活死染料用的，不太会染上蛋白材料的可以使用？
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1楼 2019-06-25 15:28:36
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xinghailiuli

新虫 (小有名气)
你好，我也想在材料上养pc12，但是不知道选哪种形态的好，能问一下，楼主用的是未分化的还是低分化或者高分化的细胞吗？

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2楼2019-09-18 14:50:05
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水?W狐狸

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xinghailiuli at 2019-09-18 14:50:05
你好，我也想在材料上养pc12，但是不知道选哪种形态的好，能问一下，楼主用的是未分化的还是低分化或者高分化的细胞吗？

用的应该是未分化的吧，后来还需要自己用神经因子诱导，都是别人给的。。。自己摸瞎弄。。

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3楼2019-09-24 13:04:53
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xinghailiuli

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 水?W狐狸 at 2019-09-24 13:04:53
用的应该是未分化的吧，后来还需要自己用神经因子诱导，都是别人给的。。。自己摸瞎弄。。
...

好的呢，请问诱导因子用的是EGF吗？大概价格是多少啊？贵了估计老板不给买

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4楼2019-09-24 13:54:52
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水?W狐狸

铁虫 (小有名气)
不是啊，是NGF.很常用的，赛默飞的，一千多一份，可以用很久

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5楼2019-09-24 19:45:58
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lks110

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能是染色液浓度太高了，找找最适浓度，参考方法：1.配制一定浓度区域的Calcein-AM和PI(Propidium Iodide)工作液；2.制备死细胞（可以用70%乙醇孵育一段时间）；3.用Calcein-AM分别染死细胞和活细胞，寻找没有染死细胞，又能染活细胞的浓度，且清晰可见；再用PI染活细胞和死细胞，寻找没有染上活细胞，又能染上死细胞的浓度，且清晰可见。具体可参考：Calcein-AM染色原理及使用说明
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没有做不成的，只有不努力的。
6楼2022-11-08 09:15:59
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