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liu33feng

[交流] 关于跑柱子后tlc流动相选择

请问大牛们 帮支招哦
我的正丁醇部分过硅胶柱(150-200目,柱长50cm,内径3.5cm)。流动相用氯仿:甲醇:水梯度洗脱(50:1:0.1     25:1:0.1     ------).  100ml一个组分收集,经活性鉴定第三个组分具有活性。可是我跑板怎么选流动相好像都跑不出来点。
对这个流动相原理不是很懂,初学,希望大家指点下,怎么选流动相。
先后用了氯仿:甲醇:水=50:1:0.1-- 25:1:0.1---10:1:0.1---5:1:0.2--65:30:1--3:3:1  好像都不行。
石油醚:乙酸乙酯=10:1-- 9:1 ---8:1---7:1--6:1---------1:1 ,还是不行哦

请大家支招哦。我再试下乙酸乙酯:甲醇各比例。 大家看行吗

非常感谢!
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xinshi

银虫 (正式写手)


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柱子可能太长了,减小柱床长度可能就好了
2楼2009-05-25 15:56:14
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pal2004

木虫 (正式写手)


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出第三个组分时的洗脱比例是什么?
已经换到氯仿:甲醇=1:1还跑不出点,确实有点奇怪。
你难道跑的是Merck的板?
3楼2009-05-25 16:57:04
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hejiangbo

木虫 (著名写手)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 5-31 01:13
建议:柱子有点细长了,短粗好点,30CM长,5cm内径,硅胶(200-300目),粗组分跑步出来点子是正常的!  直接氯仿甲醇水=10:1:0.1到5:1:0.2进行梯度洗脱!
兜兜转转半生已过
4楼2009-05-30 17:01:52
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chases

新虫 (小有名气)


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你可以试着用丙酮分离一下 增加分散力看能否分开
5楼2009-05-31 08:52:12
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zilong22

木虫 (正式写手)

培育天才的土壤

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复! 5-31 13:20
说点吧,因为这段时间正在做这个东西:
1.你怎么知道跑不出来样品点,请问显色剂选择正确了没有?你确定没有点吗?
2.你的展开剂是怎么选择出来的,参考文献?还是自己摸索的?
3.你选的展开剂好像极性都比较大,另外氯仿作为展开剂,吸附解析过程可能会导致样品点很分散,氯仿(乙酸乙酯,正己烷?试下):甲醇:水。
还想问啥的话,我尽力回答,你说的比较含糊,分离的是黄酮?生物碱?还是皂苷
培育天才的土壤
6楼2009-05-31 09:53:56
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panda179

铜虫 (小有名气)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 6-1 00:08
我觉得5楼的说得比较好:
1)像通用的碘蒸气有时候不如硫酸。
2)如果你的成分是生物碱,是否应该要考虑下硅胶板跑会不会不好。而皂苷类有时就较难跑出点。
7楼2009-05-31 15:00:27
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jmq0535

金虫 (正式写手)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 6-1 00:08
我的感觉是你首先要确定化合物的性质,根据具体的物质性质选择合适的分离方式,我过柱子的经验是按照TLC跑板的1/3-1/2进行洗脱,这样的话比较合适,一般都可以洗脱下来,要是极性不够还可以给继续加。
8楼2009-05-31 16:05:21
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