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[交流]
信号分子（AHLs）提取方法及检测
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请问有人做过人工湿地中AHLs的提取吗（其他微生物系统中也行）？我们提取后通过LC-MS/MS检测不出峰，以下使我们的提取方法及细节，求有经验的老师同学指正： 1.取25mL水样（通过注射器从填料中取样，泥水混合物，泥较少），0.45um膜过滤； 2.取等量的乙酸乙酯萃取三次（没有酸化，看文献有用甲酸和乙酸酸化都有用的；萃取的时候没有分液漏斗振荡器，纯人工振荡几分钟不知道有没有萃取完全），收集有机相（约75mL）; 3.旋转蒸发仪，负压0.075Mpa,温度35  摄氏度进行旋蒸。因为没有冷却装置，收集瓶中没有回收到冷凝的溶剂（应该是真空泵抽走了，但是我的目的不回收溶剂应该不影响）。而且75mL的乙酸乙酯的旋蒸速度很慢，大概要蒸7-8个小时，不知道是不是旋蒸仪有问题，还是乙酸乙酯的沸点算是比较高的那种（看网上说150mL正己烷才10min左右）；4.蒸干后用3mL的甲醇?櫹凑舴⑵浚�0.22um膜过滤，装于1.5mL色谱瓶（透明）； 5.送样到学校分析测试中心，实验室老师要我放在4度冰箱冷藏（实际应该是-20度冷冻室）。实验室老师也没有及时测，一般要过个4-5天才上机测试，是否有影响？ 另外，LC-MS/MS检测AHLs的方法是根据文献上来的，用标准物质做标准曲线时线性关系很好，检测方法应该问题不大。 |
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