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xissy

铜虫 (小有名气)


[交流] 哺乳细胞表达蛋白实验规范

求教各位大神,我们实验室做的哺乳细胞瞬时表达,一般只能做4-5一天。实验室条件不好,也不知道控制的度在哪里,例如是否所有试剂都要买进口的,例如所有水要用注射用水等等。请假各位大神帮忙分析原因。先说明一下我们的基本操作。
1.培养基试过很多,Invitrogen的Freesytle293,OPM,欧文,Acro,Highclone等等。一般会自己配置谷氨酰胺。之前就是用的常规试剂谷氨酰胺和去离子水。请问这一步是否需要用专门细胞培养的液体谷氨酰胺呢?进一步,涉及细胞表达的试剂,都需要购买细胞培养级别的吗?
2.转染试剂用的PEI,之前也是用去离子水配制的,是否应该用注射用水配制呢?
3.我们用的培养瓶是蜀牛的三角瓶,泡酸。一般1年换一次酸。这个中间需要注意什么吗?
4.我们的培养瓶和养昆虫的细胞培养瓶是共用的,一起泡酸。请问可以吗?
目前只想到这么多。谢谢各位!
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Diego_C

新虫 (小有名气)



xissy(金币+1): 谢谢参与
我们的确是一个人的生活方式是什么时候回来呀?

发自小木虫IOS客户端
3楼2019-06-20 07:19:51
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简单回复
2019-06-19 16:11   回复  
xissy(金币+1): 谢谢参与
2019-06-20 07:55   回复  
xissy(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫IOS客户端
youngen5楼
2019-06-21 07:50   回复  
xissy(金币+1): 谢谢参与
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