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雪色残洋

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR引物浓度选择

关于PCR做引物浓度的筛选,最近要做反应体系的优化,决定先从引物浓度开始入手,因为引物的终浓度一般是在0.1~0.5之间的,所以引物稀释的终浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5这五个点,做了两次了。
       有以下问题:
                        1.标准曲线的斜率都小于1;
                        2.做出来的两个实验结果是相反的(第一次是0.1的扩增最好,电泳条带也最亮,第二次是0.5的扩增最好)
                        3.实验设计是不是有什么问题?
         求助!!!
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