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chunling121

新虫 (初入文坛)

[求助] 4000多大小的片段P不出来 已有1人参与

各位大神,4000多大小的片段P不出来怎么办?
急急急

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biosci

捐助贵宾 (知名作家)



西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-12 22:19:58
模板重新提好,换dna聚合酶

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2楼2019-06-12 22:05:37
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丹朱楚晴

新虫 (初入文坛)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-06-12 22:20:09
1.换种高效酶2.延长延伸时间3.增加引物长度4.更换引物5.降低退火温度6.使用梯度PCR,差不多就可以了

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3楼2019-06-12 22:11:46
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果做了很多次做不出来,就想其他方法,比如融合PCR,将你的目的基因分成上下2000bp的两段,分别设计引物,两段有重叠区域,分别得到PCR产物,以这些产物为模板再进行PCR,应该可以做出来。你试试吧,祝好运。
4楼2019-06-13 08:05:48
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