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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 4000多大小的片段P不出来
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chunling121

新虫 (初入文坛)

[求助] 4000多大小的片段P不出来 已有1人参与

各位大神，4000多大小的片段P不出来怎么办?
急急急

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1楼 2019-06-12 18:12:18
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-12 22:19:58
模板重新提好，换dna聚合酶

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2楼2019-06-12 22:05:37
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丹朱楚晴

新虫 (初入文坛)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-06-12 22:20:09
1.换种高效酶2.延长延伸时间3.增加引物长度4.更换引物5.降低退火温度6.使用梯度PCR，差不多就可以了

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3楼2019-06-12 22:11:46
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果做了很多次做不出来，就想其他方法，比如融合PCR，将你的目的基因分成上下2000bp的两段，分别设计引物，两段有重叠区域，分别得到PCR产物，以这些产物为模板再进行PCR，应该可以做出来。你试试吧，祝好运。
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4楼2019-06-13 08:05:48
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