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重组子转入BL21(DE3)后涂板挑菌做菌液PCR没有条带
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我的具体情况是这样的：重组子经测序正确后，转入BL21(DE3)，然后涂板挑了4个单菌落，我用其中的一个做了一次常温表达，结果所有时间梯度（之前实验已经确定最适iptg浓度）都没有目的条带，并且超声破碎后也没有发现目的条带，后面就做了一次菌液pcr鉴定，结果阴性对照没有条带，还有两个菌落样品也没有条带（包括用来做表达的样品）。 我疑惑的就是重组质粒的转化，怎么会出现没有目的基因的抗性菌落？并且我做表达的时候，未诱导的一组在目的蛋白的位置出现了一条带，其他组却没有，这又是为什么？ 发自小木虫Android客户端 |
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