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松竹

金虫 (正式写手)

[交流] 实验室常用氨苄青霉素储存液的配制方法

http://blog.bioon.com/user1/2081/archives/2009/230950.shtml

目的:配制500ml的50mg/ml氨苄青霉素贮存液。

实验用品的准备:足够量的2ml的EP管,滤头(内装有两层滤膜)、两个50ml的离心管、注射器,以上用品除注射器外都要进行高压灭菌;

注意:

(1)滤头灭菌前,安装滤膜时,不要旋得太紧,待灭菌后使用前于超净台上用力旋紧,以防漏液。
(2)EP管,滤头、两个50ml的离心管灭菌后要进行烘干。

抗生素溶液的配制:

(1)称取25g的氨苄青霉素粉末,倒入盛有200—300ml去离子水的烧杯中,最好在烧杯上面盖个东西(封口膜或者干净的滤纸),以防止粉末飘出,轻摇烧杯,可见氨苄青霉素粉末迅速溶解。
(2)待氨苄青霉素粉末溶解完,加去离子水至500ml,稍等几分钟让粉末完全溶解,以免过滤时堵塞滤膜。

氨苄青霉素溶液的过滤除菌及分装:

(1)取出旧报纸包裹的滤头,用力旋紧,备用。
(2)用注射器吸取配制好的溶液,然后把滤头安在注射器上,缓缓推动注射器活塞,把溶液经滤膜推至50ml的离心管中,直至把两个离心管都注满。
注意:动作用缓和,一只手拿着活塞,一只手拿着滤头,使滤出液出口正对着离心管,还要防止染菌。
(3)把50ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到2ml的EP管中。
(4)重复(2)、(3)直至把500ml溶液分装完毕。
(5)在EP管上做好标记,包括名称、日期等。
(6)把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。
http://blog.bioon.com/user1/2081/archives/2009/230950.shtml
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anik

银虫 (正式写手)

现在国外的试剂的纯度已经很高,可以直接用双蒸水配需要的浓度即可使用。
2楼2009-05-23 15:01:37
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rest_cjt

新虫 (初入文坛)

配好母液,用一次性0.22μm滤膜,用注射器打入灭过菌的离心管。
3楼2009-06-04 01:19:07
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主

这个一搜应该到处都有吧  
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
4楼2009-06-04 09:34:21
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gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得这个到处都可以找到,但是各位有没有注意到通常买到的青霉素有两种,一种是Ampicillin Sodium salt,水溶性很好,可以用它来配制100mg/ml的母液,另一种是Ampicillin trihydrate, 在水中的溶解度很低,你用它来配试试就知道了。

建议发帖时尤其像这种向他人提供信息的贴子最好能够涉及细节,毕竟细节决定成败。
5楼2009-06-04 10:46:17
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塞外雨

金虫 (著名写手)

支持学习了
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
6楼2009-06-04 10:54:16
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灵笛

新虫 (正式写手)

简单方法


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看你要配多大的容易了,如果是10Ml等等,建议直接称取配成10*浓缩液,分装冻存(常温或低温易失效),用时即取加入就可以了。记住手一定要洗干净酒精棉擦一下或者带上手套(我们很少过滤,也没见到过污染)动作要轻,称量完青霉素放入EP管稀释成浓缩液就可以了(溶解度很大的,不用太担心,但解冻后一定要摇匀),
7楼2009-06-06 13:19:09
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ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2009-6-4 10:46:
我觉得这个到处都可以找到,但是各位有没有注意到通常买到的青霉素有两种,一种是Ampicillin Sodium salt,水溶性很好,可以用它来配制100mg/ml的母液,另一种是Ampicillin trihydrate, 在水中的溶解度很低,你用 ...

不错!细节很重要,谢谢
8楼2009-06-06 13:22:22
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
学习了,多谢4楼的指点,我还从来没有注意过呢
9楼2009-06-06 16:14:17
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
虽然配的东西很简单,但看得出每个细节都谈到了。支持。
Thank-you,so-blue.
10楼2009-06-06 17:30:06
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