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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 克隆不到目的基因
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孙健诚

新虫 (初入文坛)

[求助] 克隆不到目的基因

是这样的，一开学老师给了我俩基因，我做了十来次测序，结果显示其中一个基因老是克隆不到目的序列。基本的测序结果分两类且重复率很高：一是在其中100bp内有缺失和突变，其它位置也有少数突变，这种结果占所有测序的一半左右；另外一种情况是全长只有3个碱基突变，氨基酸没突变，但是重复率很低。后来改进设计分引物结果分引物设计老是有问题，温度相差太大找了很多位置都是这样。这困扰了我好几个月了，有没有能帮忙解答一下，谢谢！
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1楼 2019-06-07 09:58:26
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子规清风

新虫 (正式写手)
是不是选用的是普通taq酶，不是高保真的啊？

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4楼2019-06-08 06:42:00
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嗯嗯嗯哈哈

新虫 (正式写手)
去公司合成

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2楼2019-06-07 10:09:50
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0o向日葵o0

新虫 (正式写手)
不会是模板序列就是突变的吧，用高保真酶了吗

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3楼2019-06-07 10:13:44
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