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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 接合转移
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Greg117

铜虫 (小有名气)

[求助] 接合转移 已有1人参与

请问下有前辈做过链霉菌的接合转移吗？我用的是大肠杆菌s17–1和刺糖多孢菌做接和，有几个问题想请教下各位前辈。
1、用于与大肠杆菌混合的孢子悬液如何制备？直接从平板上刮单菌落到lb中吗？
2、好多文献上都写孢子量:大肠杆菌=10∧8/ml:10∧8/ml等体积混合，我想请问下这边的浓度大家一般怎么估计的啊，大肠杆菌可以看od，孢子悬液浓度呢？心里着实一点数都没有。。。
希望做过的前辈能慷慨指导，万分感激。

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1楼 2019-06-05 22:52:11
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武鑫鑫

新虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-06 07:48:32
建议:用无菌水在平板上冲下来，加到离心管里，血球计数板观察，计算大概浓度

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Greg117
2楼2019-06-05 23:15:43
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sannny

新虫 (正式写手)
楼主，我最近做实验也要用S17-1，请问能跟你换一下这个菌吗？非常感谢。

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3楼2019-06-06 06:07:19
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Greg117

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sannny at 2019-06-06 06:07:19
楼主，我最近做实验也要用S17-1，请问能跟你换一下这个菌吗？非常感谢。

可以的，您私我个联系方式吧，我加您。

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4楼2019-06-06 07:56:50
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Greg117

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武鑫鑫 at 2019-06-05 23:15:43
建议:用无菌水在平板上冲下来，加到离心管里，血球计数板观察，计算大概浓度

好的，谢谢您，我回头找个计数板试试看。

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5楼2019-06-06 10:44:46
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xhl1024

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Greg117 at 2019-06-06 10:44:46
好的，谢谢您，我回头找个计数板试试看。
...

你好，做出来了吗？可否分享一下经验？我做了好久都长不出来，而且平板表面还长了一层菌膜的感觉，实验室也没人做过。一脑子懵。
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6楼2020-09-21 22:39:40
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flywolf383

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

除了血球计数，还可以做梯度稀释做平板萌发数菌落确定孢子浓度
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7楼2020-09-24 09:16:50
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MrDragons

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武鑫鑫 at 2019-06-05 23:15:43
建议:用无菌水在平板上冲下来，加到离心管里，血球计数板观察，计算大概浓度

兄弟，你好。我想问一下，血球计数板计数的时候，发现孢子没有散开，成团状，不好计数。这个应该怎么处理能让孢子在计数板上分散开来？谢谢了
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8楼2021-06-23 09:40:20
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