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Greg117

铜虫 (小有名气)

[求助] 接合转移 已有1人参与

请问下有前辈做过链霉菌的接合转移吗?我用的是大肠杆菌s17–1和刺糖多孢菌做接和,有几个问题想请教下各位前辈。
1、用于与大肠杆菌混合的孢子悬液如何制备?直接从平板上刮单菌落到lb中吗?
2、好多文献上都写孢子量:大肠杆菌=10∧8/ml:10∧8/ml等体积混合,我想请问下这边的浓度大家一般怎么估计的啊,大肠杆菌可以看od,孢子悬液浓度呢?心里着实一点数都没有。。。
希望做过的前辈能慷慨指导,万分感激。

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武鑫鑫

新虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-06 07:48:32
建议:用无菌水在平板上冲下来,加到离心管里,血球计数板观察,计算大概浓度

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2019-06-05 23:15:43
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sannny

新虫 (正式写手)

楼主,我最近做实验也要用S17-1,请问能跟你换一下这个菌吗?非常感谢。

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3楼2019-06-06 06:07:19
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Greg117

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sannny at 2019-06-06 06:07:19
楼主,我最近做实验也要用S17-1,请问能跟你换一下这个菌吗?非常感谢。

可以的,您私我个联系方式吧,我加您。

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4楼2019-06-06 07:56:50
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Greg117

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武鑫鑫 at 2019-06-05 23:15:43
建议:用无菌水在平板上冲下来,加到离心管里,血球计数板观察,计算大概浓度

好的,谢谢您,我回头找个计数板试试看。

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5楼2019-06-06 10:44:46
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xhl1024

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Greg117 at 2019-06-06 10:44:46
好的,谢谢您,我回头找个计数板试试看。
...

你好,做出来了吗?可否分享一下经验?我做了好久都长不出来,而且平板表面还长了一层菌膜的感觉,实验室也没人做过。一脑子懵。
6楼2020-09-21 22:39:40
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flywolf383

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

除了血球计数,还可以做梯度稀释做平板萌发数菌落确定孢子浓度
7楼2020-09-24 09:16:50
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MrDragons

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 武鑫鑫 at 2019-06-05 23:15:43
建议:用无菌水在平板上冲下来,加到离心管里,血球计数板观察,计算大概浓度

兄弟,你好。我想问一下,血球计数板计数的时候,发现孢子没有散开,成团状,不好计数。这个应该怎么处理能让孢子在计数板上分散开来?谢谢了
8楼2021-06-23 09:40:20
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