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sunrunhong

新虫 (初入文坛)

[交流] 何谓植物瞬时表达及稳定表达

想问一下各位高人,何谓植物的瞬时表达?何谓植物的稳定表达?并且瞬时表达和稳定表达所用的载体有什么区别?谢谢了。
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thaw

铜虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 5-29 18:05
sutao1979(金币+2,VIP+0):个人同意此说法 5-29 20:52
瞬时表达就是非永久性的,仅仅是短时期的,在本代的一个阶段表达。我们是用基因枪轰击叶片,一般第二天就可以看到表达。这种表达,基因是独立的不会整合到植物基因组中,所以会随着所在组织的消亡而消亡,不会到其他组织。
稳定表达是可稳定遗传的,基因融合到植物基因组中一种形式。这是要求载体要有左右边界,以便于插入植物基因组中。禾本科往往会用茎尖,幼胚做受体,用基因枪或农杆菌介导的方法把基因打入植物细胞,然后诱导愈伤组织,在诱导分化。这样就能得到稳定表达的植株。拟南芥等植物往往采用侵染花来实现。
5楼2009-05-25 20:31:08
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aga0110125

银虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 5-29 18:05
我做的瞬时表达一般是为了检测一下我构建的表达载体能不能正常表达,因为我们一般使用农杆菌转化,农杆菌是原核细胞,而我的体系是真核生物的表达体系,所以用农杆菌侵染植株,然后立刻观察,此时T-DNA并没有转化到基因组里,但是在真核的表达体系中可以表达我的载体,以次检测;而稳定表达我觉得是整合到基因组里,可以随基因组分裂遗传
4楼2009-05-25 14:50:44
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普通回帖

Milanmy

银虫 (小有名气)

我们做瞬时表达用的是大豆热激蛋白启动子连接目的基因,把转基因植物放在37度下,目的基因就会表达。稳定表达是指35S启动子吧。
2楼2009-05-23 15:19:04
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sunrunhong

新虫 (初入文坛)

谢谢了,但本人觉得不完全对。希望有人接着回答。
3楼2009-05-25 11:59:09
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sunrunhong

新虫 (初入文坛)

多谢了,增长了知识。但有一个疑惑,T-DNA区的作用不就是整合到植物基因组中么?但瞬时表达和稳定表达所用的载体有什么区别?这个问题还没回答。
6楼2009-05-29 17:55:10
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zyjuan3690

金虫 (小有名气)


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建议你去看看 《植物基因工程》(王关林)这本书,里面讲的比较详细!
7楼2009-05-30 10:24:39
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新人小玥

木虫 (正式写手)

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amisking(金币+1,VIP+0):鼓励一下! 5-31 18:55
我知道的瞬时表达有叶片和原生质体的
叶片可以用农杆菌转染,原生质体可用PEG转染,由于其中含有GUS或GFP基因,可以在短时间内看到表达。
而稳定表达是要观察到表形,拟南芥要经过花的转染,然后得到种子,查看植株是否有基因的表达。

不过不知道是不是正确。
8楼2009-05-31 18:24:30
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aga0110125

银虫 (小有名气)


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稳定表达不一定全部能看到表形变化,很多基因转入并没有表形变化,甚至都不表达,那你怎么观察确定呢。
9楼2009-06-01 17:01:50
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Milanmy

银虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-3 08:22
楼主的问题是瞬时表达和组成型表达载体,4楼回答的是转基因后载体的瞬时表达和组成型表达,两个不同概念!不知道是楼主问法有误,还是大家没有看明白问题啊?
四楼的说法没有错,只是文不对题!
10楼2009-06-02 18:42:17
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