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shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 5-RACE没有条带,为什么?

现在正在做5’RACE,买的是CLONTECH的RACE试剂盒。按照说明书做完第一链反转录后,用Advantadge 2 PCR MIX做扩增,扩不出需要条带。没办法,把CDNA做了一次内对照,发现能扩出基因的中间片段,但是做全长时用试剂盒接头引物与5特异引物扩增不出需要条带,实在找不出原因,那位做过的请帮忙分析一下,非常感谢。
PS:以前是用TAKARA的RACE试剂盒做的,条带倒是有,但是都是假阳性,这个可好,一点条带都没有,
郁闷
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88196861

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也是啊。希望高手指点
3楼2009-08-26 16:49:03
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super1998

金虫 (小有名气)

中间EST上是设计了NEST引物么?分两次扩,第一轮没有东西正常,第二轮再稀释一遍在用NEST2扩一次,试试看!
123
2楼2009-05-24 23:49:11
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88196861

铜虫 (小有名气)

是不是rna质量不够好,接头没加上
4楼2009-08-26 16:49:41
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xuhuaiqian

铁虫 (初入文坛)

我也是这个问题啊,求高手,对照的RNA也扩增不出5'RACE产物
5楼2009-08-28 09:25:08
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