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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 目的基因连接T载体 菌落pcr没有目的条带
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三只0小猪仔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 三只0小猪仔 at 2019-06-03 20:06:52
所以是菌落pcr引物不行吗？ 那我重新合成一条再试试？
...

还有一个问题就是用通用引物还用加上酶切位点吗

发自小木虫IOS客户端
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11楼2019-06-03 22:26:21
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黑暗微光

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
都是白色？可以考虑是否是X-GAL（这东西见光易分解）被降解掉了，亦或者是没涂好，导致菌一片白色。
过夜平板培养后，菌长的密密麻麻，考虑稀释一下，倍数的话，自己看着办就好。
同样，如果白色菌多了，也可能抗生素出了问题。
再用克隆试剂盒自带的那个DNA做一个阳性对照，看下转化效率。
同时希望楼主做出来后，能在这个地方说一下，您是怎么解决的，谢谢。
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12楼2019-06-04 15:53:10
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