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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 激酶活性检测及Km值计算
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新虫 (初入文坛)

[求助] 激酶活性检测及Km值计算

各位站友：我想请教一下，我们现在做了一个蛋白激酶的酶活鉴定，其可以磷酸化底物发挥作用，我们利用P32标记进行了酶活检测，孵育后进行了SDS-PAGE，然后在磷成像仪下进行了扫描，如何利用获得的胶图来进行Km值计算呢？

多谢各位！！！

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1楼 2019-05-29 21:14:06
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rohdy

新虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-30 22:25:15
灰度图得到条带的数值就可以很浓度作图啦

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2楼2019-05-29 23:30:57
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新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rohdy at 2019-05-29 23:30:57
灰度图得到条带的数值就可以很浓度作图啦

但是得到的图应该是一个相对水平图吧，我要是计算Km的话怎么里计算呢

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3楼2019-05-30 10:52:55
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rohdy

新虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 起一个昵称 at 2019-05-30 10:52:55
但是得到的图应该是一个相对水平图吧，我要是计算Km的话怎么里计算呢
...

Km的单位是浓度，跟你纵坐标的数值是绝对值和相对值没有关系

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4楼2019-05-30 11:04:22
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