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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求解惑！在酿酒酵母中过表达自身的含内含子的基因能否正确被剪切
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晓晓凶

新虫 (初入文坛)

[求助] 求解惑！在酿酒酵母中过表达自身的含内含子的基因能否正确被剪切 已有1人参与

大佬们，最近要过表达酵母中自身的一个基因，我看别人都是RTPCR或者直接合成的。要是直接PCR这段含内含子的基因后再通过载体导入进酵母中表达，能否顺利剪切内含子后表达？还是说整合表达能正确剪切，游离表达不能剪切。求教各位大佬指点一下。
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1楼 2019-05-29 20:19:38
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-30 22:22:34
都不能正常剪切

发自小木虫Android客户端
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2楼2019-05-29 23:19:30
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-30 22:22:21
晓晓凶: 金币+5 2019-06-05 10:25:26
我想知道你为什么不想通过反转录得到cDNA再去PCR得到目的片段。你是想通过直接扩增基因组得到含内含子的片段吗？估计很难实现正确的剪切，还是老老实实做吧。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2019-05-30 15:49:11
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