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免疫组织化学中应用最广泛的是什么？详细实验步骤送给你！
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附【免疫组化原理及实例分析资源包】 一、免疫组化原理 免疫组织化学技术/ ihc 应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原，对其进行定位、定性及相对定量的研究方法。 二、免疫组化分类 主要有以下类别： ① 荧光素---免疫荧光组化 ② 酶---免疫酶组织化学 ③ 胶体金---免疫胶体金组化 ④ 高亲和力物质---亲和免疫组化 1、免疫荧光组化 用荧光素标记的抗体检查组织内相应抗原。抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射即会发出特定波长的荧光，在荧光显微镜下可对抗原定位或定量。  皮肤组织免疫荧光组化。利用荧光标记的抗补体抗体进行免疫荧光染色。箭头指示表皮与真皮的交界有免疫复合物存在。 特点：特异性强、灵敏度高、快速简便，应用较广。 2、免疫酶组化 以酶标记的抗体与组织作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物，通过光镜对细胞表面和细胞内的抗原进行定位定量。 免疫酶组化-食道鳞癌ck5/6染色并he复染，肿瘤细胞胞质阳性。 特点：信号定位准确，标本可长期保存，易于检测阳性标记与病变关系，方法简便，易推广，是目前最常用的技术。  3、免疫胶体金技术 ① 用胶体金标记的抗体作为探针，对抗原进行定性、定位，或定量研究。 ② 胶体金是指金的水溶胶，能迅速而稳定地吸附抗体而不影响抗体活性。 免疫胶体金染色，人结肠癌石蜡切片，胶体金标记coxiv抗体。 特点：胶体金有不同大小的颗粒，且电子密度高，所以特别适合于电镜的定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色，因此也适合进行光镜观察。 4、亲和免疫组化 利用两种物质间高度亲和特性及可标记性，将酶等标记物连接到亲和物上，以对待检物进行检测。  [color=green 免疫亲和组化，人胃癌石蜡切片，鼠抗人wnt-2一抗，亲和素-hrp染色，苏木精复染(蓝色)。 特点：灵敏度高，有利于微量抗原在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素—抗生物素染色法最常用。 以上中免疫酶组化应用最广，下文中会针对免疫酶组化的实验步骤做详细解析。  三、免疫组化实验步骤 1.免疫酶组化步骤 ① 标本制备  ② 免疫染色  ③ 数据获得（观察） 2、标本制备  3、免疫染色-石蜡切片  4、数据获得  |
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2019-05-27 10:59:41, 60.37 K
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