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六月雪樱花

新虫 (正式写手)

[交流] 载体构建 已有4人参与

载体质粒甘油菌进行过夜摇菌，第二天没有变化，求解答
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1楼 2019-05-24 10:04:59
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秋风落叶6

新虫 (小有名气)
★
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1,摇菌时间12-14h

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2楼2019-05-24 11:41:08
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秋风落叶6

新虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:46:51
2,保存的菌种是不是时间过长，需要复苏，可以先在不含抗性的培养基上复苏，之后再在抗性培养基上培养

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3楼2019-05-24 11:44:37
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yujitianqing

铁虫 (正式写手)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:47:00
正如楼上所述，菌种保存时间过长或者反复冻融所致。最后的摇出来菌再用菌落PCR检测检测有没问题。
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4楼2019-05-25 15:47:49
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一个不小心就

金虫 (正式写手)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:47:15
抗性用错了？大肠杆菌的话冻个一年完全不影响活性。
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5楼2019-05-25 16:36:49
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六月雪樱花

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 秋风落叶6 at 2019-05-24 11:44:37
2,保存的菌种是不是时间过长，需要复苏，可以先在不含抗性的培养基上复苏，之后再在抗性培养基上培养

前一天保的菌，第二天晚上摇的，过夜没长，然后白天又摇了一天，晚上长了

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6楼2019-05-26 06:13:36
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六月雪樱花

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2019-05-25 16:36:49
抗性用错了？大肠杆菌的话冻个一年完全不影响活性。

抗性没错，之前也出现过这个抗性不长的问题

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7楼2019-05-26 06:14:16
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秋风落叶6

新虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by 六月雪樱花 at 2019-05-26 06:13:36
前一天保的菌，第二天晚上摇的，过夜没长，然后白天又摇了一天，晚上长了
...

鉴定一下，摇的时间长抗性失效，可能是杂菌

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8楼2019-05-27 00:22:37
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六月雪樱花

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 秋风落叶6 at 2019-05-27 00:22:37
鉴定一下，摇的时间长抗性失效，可能是杂菌
...

提完质粒后跑电泳，条带大小应该是正确的，谢了

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9楼2019-05-27 05:53:37
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xue&徐

新虫 (小有名气)
★
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我也会出现这种状况，可以先在平板上画个线活化一下挑单菌落再培养

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10楼2019-07-05 23:26:50
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