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大瓜哎呀呀

银虫 (小有名气)

[交流] 觉得自己好没用呀,罐都上不出来 已有4人参与

最近好烦啊,连着上了3个礼拜的罐,熬夜也熬了不少,可是这大肠实在难对付,这么久了都上不出来。两周一次报告会上被导师批评说毕不了业,明明上学期没啥问题的,这学期为啥就上不出来了,别人都能做出来都就我做成这样,师兄也说我十有八九被人下了蛊了,我自己也好烦啊.....希望广大虫友们帮忙支招啊啊啊
情况是这样的,
这次大肠上罐因为怕菌株长的太快,我37d度养了2h后转用35度再养2h,期间溶氧一直高于30%,然后开始降温用22度诱导,前期ph虽然一直持续小幅上升,但我想可能是大肠在利用氮源,倒也算正常,诱导时od大约为7.8的样子,但诱导22h后发酵发酵液呈现粘稠状,od只有12,这不基本等于没长么,测酶活也没有酶活,如果诱导时间短一些倒是会不那么黏稠,但od和酶活也很低,过程测od确实呈下降趋势,镜检菌落形态单一,应该不是染菌,中途也有补加甘油和乳糖,应该不会缺碳源,ph用氨水补加的,实在想不出什么原因,若是菌体老化自溶,那ph应该会升高啊,可是诱导后期ph呈下降趋势啊……实在想不明白为什么,想的我头发都白了,一晚上就老了10岁啊啊啊

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2楼2019-05-24 05:49:37
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sannny

新虫 (正式写手)


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粘稠肯定是菌裂解了,核酸释放出来了。想问一下你的传感器都校准了吗?溶氧那么高肯定不对,快去生长期耗氧很快的。

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3楼2019-05-24 07:10:18
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1851368885

铜虫 (小有名气)


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温度对吗?校正下温度探头。
4楼2019-05-28 16:44:26
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凤久夜

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想问一下解决了吗?也出现同样的问题
5楼2020-05-11 14:27:46
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