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Frank Yan

新虫 (小有名气)

[求助] cDNA的PCR扩增，已有1人参与

本人做的转录组测序的东西。

以总RNA反转录的cDNA为模板，利用不同差异表达基因序列设计引物，进行PCR扩增，有些基因引物可以扩增出条带，有些基因的引物不可以，原因有哪些，是不是引物有问题

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让青春继续
1楼2019-05-22 23:12:49
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请教各位

新虫 (小有名气)
跟你一样的情况，至今还未克隆出来

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2楼2019-05-23 10:09:15
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965688871

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:52:19
没做过相关实验，只能给点个人建议

引物收到后，先用gDNA进行PCR，P出条带，首先证明引物好用。P不出条带，对PCR条件进行优化，如果还是不行，可能是引物不好，重新设计。

等引物都确定好用后，再用cNDA进行PCR。不然P不出条带，谁也不知道是表达量低还是引物的问题。
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3楼2019-05-23 16:03:15
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