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your2007

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 实验重复不出来,苦闷中

大家好,我用BL21(DE3)pLysS表达我的目的蛋白。。按照常规的培养和诱导时间就是不出来,去年底的时候是表达出来的,现在怎么也重复不出来了,十分苦恼,不知道到底是什么原因,先谢谢啊,
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爱人者被爱,敬人者人敬
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bbyu007

木虫 (正式写手)

当实验无法重复时,我就认为它是伪科学。。。但是,歇一段,又做出来了。。。
我是笨笨鱼~~~
2楼2009-05-20 15:14:38
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jqq1985

银虫 (正式写手)

用原始质粒再电转试试看,换其他的DE3菌种再试试看
3楼2009-05-20 18:20:37
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anik

银虫 (正式写手)

讲讲你的实验过程
4楼2009-05-20 18:44:22
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renyjzx2008

金虫 (小有名气)

最好的方法就是停下来,分析查找问题。看看文献,理理思路再做,祝早日解决问题!
5楼2009-05-20 18:49:06
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

我的经验:
长时间保存的甘油管涂平板,长出菌落后,
挑取10-20个,摇瓶验证和筛菌,
100%都表达的平板,才可以做下一步实验。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2009-05-20 20:52:22
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muchong5577

金虫 (正式写手)

不要灰心  继续努力  实验就是枯燥的重复。
7楼2009-05-20 23:29:45
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pph0259

木虫 (正式写手)

一定要挺住!
我去年也一度重复不了实验,坚持了3个月,呵呵
还是部分又重复出来了。
8楼2009-05-21 00:42:04
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

将质粒重新转化一下,然后表达
52187644
9楼2009-05-21 07:27:57
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amilie030312

金虫 (正式写手)

比较赞成先休息一段时间的说法,做实验如果一直重复不出来那就干脆不要做了,时间金钱都是浪费,休息一下,查看一下前段时间的实验哪里有了什么问题,静下来想想往往能相处问题出在哪里,盲目的一直做下去不是啥好办法
10楼2009-05-21 10:07:15
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