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不二教主二

新虫 (小有名气)

[求助] 请问转化大肠杆菌过程中需要加的LB培养液需不需要加含抗生素的已有1人参与

请问转化大肠杆菌过程中需要加的LB培养液需不需要加含抗生素的,如果不需要的话,加了含抗生素的有什么影响吗

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sannny

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不二教主二 at 2019-05-10 17:47:06
我之前记错了,就一直加含抗生素的LB,然后摇菌涂板,不知道为啥也长出来了
...

这个不是绝对的,加无抗培养基培养一小时是为了让细菌在接触抗生素前提前表达好抗性蛋白。抗性蛋白是转进去的质粒表达的,一转进去就应该在表达,至于表达了多少,不好说,有可能有的表达的多不会被杀死。所以,不是绝对的。而且大部分抗生素是抑菌作用,并非杀菌。比如氨苄,随着抗生素被破坏,即使没有转进去的菌也能生长,这就是卫星菌落的来源。所以,为了实验结果可靠,还是加的好。某些生长慢的菌,比如酵母,接了后培养的时间要更长,不止一小时。

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6楼2019-05-10 20:40:25
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luckydog52

木虫 (著名写手)

孵育1 h 的时候不加,涂板的时候再加。就是让它们缓缓

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自信源于一次次成功的积累
8楼2019-05-10 22:25:11
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junjieshao

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

9楼2019-05-11 04:33:17
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sannny

新虫 (正式写手)

2楼2019-05-10 17:34:58
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听世界喧闹1

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2019-05-10 17:36:10
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不二教主二

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sannny at 2019-05-10 17:34:58
不能加,会死。

我之前记错了,就一直加含抗生素的LB,然后摇菌涂板,不知道为啥也长出来了

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4楼2019-05-10 17:47:06
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不二教主二

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 听世界喧闹1 at 2019-05-10 17:36:10
不加

好的,谢谢

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5楼2019-05-10 17:47:29
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sannny

新虫 (正式写手)

氨苄抗生素的启动子是组成型启动子。

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7楼2019-05-10 20:58:30
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不二教主二

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sannny at 2019-05-10 20:40:25
这个不是绝对的,加无抗培养基培养一小时是为了让细菌在接触抗生素前提前表达好抗性蛋白。抗性蛋白是转进去的质粒表达的,一转进去就应该在表达,至于表达了多少,不好说,有可能有的表达的多不会被杀死。所以,不 ...

非常感谢

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10楼2019-05-11 15:31:06
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